毛伯溫，字汝厲，江西吉水人。
祖父毛超，做過廣西知府。
伯溫考中正德三年(1508)進士，初任紹興府推官，後升任禦史，先後巡按福建、河南。
世宗即位後，宦官張銳、張忠等被判死刑，他們的同夥蕭敬、韋靈暗中想拖延行刑。
伯溫上書請一并殺了蕭敬、韋靈，宦官們因此才閉上了嘴巴。
嘉靖初年，伯溫升為大理寺丞。
後來又升為右佥都禦史，巡撫甯夏。
李福達一案被重新提起，伯溫因為在大理寺時誤判重罪，被罷官歸鄉。
後來因為他人推薦恢複舊職，讓他巡撫山西，又改為巡撫順天，他都沒有上任。
朝廷于是讓他改為辦理都察院的事務，提升他為左副都禦史。
在這個職務上，他又受到趙王府的族人朱..椋的攻擊，被解除官職聽候考察。
過後又被開除了職務。
十五年(1536)冬天，皇子出生，打算向外國頒布诏書。
禮部尚書夏言認為安南多年不來朝貢，不應當派遣使節，并進而請讨伐它。
世宗于是起用伯溫為右都禦史，讓他和鹹甯侯仇鸾整兵待命。
伯溫以父喪在身推辭，世宗不答應。
第二年五月伯溫到達京城，遞上六條方略。
恰好這時安南國王孫黎甯派遣陪臣鄭惟僚等人來訴說莫登庸弑君篡權，請中國興兵替他們複仇。
世宗懷疑情況不真實，命令伯溫暫緩出兵，傳令兩廣、雲南守臣調查以後報上來，同時讓伯溫協助辦理都察院的事務。
禦史何維柏奏請讓伯溫守完喪，世宗不答應。
伯溫隻好稱病不出，一直到除喪服的祭祀過後才出來理事。
這年冬天，伯溫升任工部尚書。
十七年春天，黔國公沐朝輔等拿登庸的降表獻給朝廷，請寬恕他的罪，允許安南來朝貢。
在此之前，雲南巡撫汪文盛奏稱，登庸聽說朝廷将發兵前往讨伐他，派人偷偷來偵察我們。
世宗已傳令要大臣按照以前的诏書出兵，文盛又采納安南投降過來的武文淵的計策，上書說登庸可以拿下來的情況，一面又傳檄要登庸向朝廷上表獻地。
到這個時候，世宗把朝輔的奏章交給大臣們讨論，大家都說不能答應他。
世宗于是改命伯溫擔任兵部尚書兼右都禦史，限期上任。
世宗認為用兵的事關系重大，并沒有非讨伐安南不可的意思，隻是想威吓制服它而已。
可是兵部尚書張瓒沒有什麼主見，完全視世宗的意思為可否。
朝中大臣們多認為不該興兵讨伐，