汪應轸，字子宿，浙江山陰人。少年有志向操行。正德十二年(1517)成為進士，選為庶吉士。
十四年(1519)皇帝下诏書準備南巡。汪應轸抗言說：“自從下诏書以來，臣民彷徨，不能安居。臨清以南，都棄業罷市，逃竄到山谷中去。如果不立即收回成命，恐生不測之變。過去谷永規勸漢成帝說：‘陛下厭惡高美的尊号，喜好匹夫之卑字。多次離開深宮，挺身晨夜，與群小相追逐。典門戶奉宿衛的人，拿着幹戈而守衛空宮。’這些話切中現實。谷永是谄谀之臣子；成帝是庸暗之君主。谷永這樣說而漢成帝寬容他。難道以陛下的聖明，不能俯納耿直的規勸嗎？”疏入，留宮中不發。繼而又和修撰舒芬等人一起連章請求這件事。跪在宮殿門口，受杖痛擊幾乎緻死。
訓課任務結束後，吏部拟授與他給事中官職，但有聖旨讓他出外任職，他于是出任泗州知州。泗州土地貧瘠，百姓懶惰，不懂耕種田地養蠶桑。汪應轸勸他們耕種，買桑苗種植；招募江南的女工，教他們缫絲織布。從此百姓豐衣足食。皇帝正在南征，中使驿車騷擾道路。汪應轸率領青壯男子一百多人排列水邊，船到後，立即挽住皇帝出境。皇帝車駕駐住南京，命泗州送進的善歌舞管奏之美婦有數十人。汪應轸說“：泗州子女粗鄙醜陋，不能稱皇上聖意。我先前招募有桑婦，請皇上将她們收納在宮中，傳授蠶事。”事情才止息。
世宗即位，召封他為戶科給事中。山東礦盜興起，搶掠東昌、兖州，流入畿輔、河南境内。汪應轸上奏說：“消弭強盜與抵禦敵寇不同。抵禦敵寇的辦法，是将他們驅逐到境外而已。如果消弭強盜而縱使他們出境，就是嫁禍給鄰國。凡一方有警，不實行撲滅，導緻延蔓他境的人，都應當重重論罪。”皇帝答複準可。在戶科一年多，共上疏三十多次，都切中時弊。後為便于養親，乞求改派南方，于是調到南京戶科。張璁、桂萼在南部，正提議追尊獻皇帝。向來知道汪應轸名氣，想倚靠他幫助自己。汪應轸與他們的提議不合，立即上奏請求遵循禮經、崇尚正統，以安定人心。皇帝不表态。
嘉靖三年(1524)春天，他出任江西佥事。過了二年，上疏稱病，不等到命令下來就回家鄉，被巡按彈劾。皇帝诏令所司逮捕查問。汪應轸說自己雙親已老，缺少兄弟，乞求休假侍養老人。吏部也為他請求，才免去逮捕。過了很久，廷臣交互推薦他，以原官起用，巡視江西學政。不久因父喪回到家鄉，後病死。